摘要
色譜柱的保養(yǎng)
內(nèi)容
色譜柱的保養(yǎng)
1色譜柱的相關(guān)性質(zhì)
1.1色譜柱的定義:裝填有固定相用以分離混合組分的柱管。多為金屬或玻璃制作。有直管形、盤管形、U形管等形狀。
1.2分類:色譜柱可分為填充柱和開(kāi)管柱兩大類。液相色譜通常均采用填充柱。色譜柱的分離效果取決于所選擇的固定相,以及色譜柱的制備和操作條件。簡(jiǎn)單而言:常見(jiàn)的分配住填料:碳十八柱(ODS/C18)、碳八柱(Octy了/C8)、碳六柱(Hexyl/C6)、碳四柱(Butyl/C4)、碳一注(Methyl/C1)、陰離子交換柱(SAX)、陽(yáng)離子交換柱(SCX)、苯基柱(Phenyl)、氨基柱(Amino/NH2)、氰基柱(Cyano/CN/Nitrile)。常見(jiàn)的吸附柱填料:硅膠柱
色譜柱的選擇會(huì)直接影響混合物中組分的分離。舉例來(lái)講:對(duì)于填充柱而言,可選擇的固定相較多,柱容量較大,但是受柱長(zhǎng)的限制,分離能力有限,主要應(yīng)用于簡(jiǎn)單化合物的分離。
2色譜柱的維護(hù)與保養(yǎng)
2.1色譜柱的維護(hù)。
在使用中,應(yīng)時(shí)常對(duì)色譜柱進(jìn)行測(cè)試。而且在使用的過(guò)程中常常有堵塞的現(xiàn)象,造成這種現(xiàn)象的主要原因是:①溶劑中的不溶物②樣品中的不溶物③泵進(jìn)樣器等中的不溶物④柱內(nèi)不溶物的形成等。
如果當(dāng)色譜柱堵塞以后我們可以對(duì)色譜柱進(jìn)行修復(fù):
首先:使用含鹽緩沖液后(如離子對(duì)試劑)應(yīng)用溶解性強(qiáng)的溶劑(如水)進(jìn)行沖洗。
其次:先斷開(kāi)檢測(cè)器,然后用對(duì)來(lái)自樣品中的物質(zhì)有強(qiáng)溶解性的溶劑進(jìn)行沖洗,對(duì)于反相色譜柱,可使用甲醇、乙睛、四氫呋喃、氯仿、庚烷等,在此條件下,應(yīng)避免溶劑的pH低于2或高于8。
最后:如果經(jīng)過(guò)上述還是沒(méi)有修復(fù),色譜柱壓力還是沒(méi)有下降,則要斷開(kāi)檢測(cè)器,將色譜柱反方向放置,然后檢查柱壓,若壓力穩(wěn)定下降,則保持色譜柱反方向連接,用低于0.5ml/min流速?zèng)_洗一小時(shí)。如果壓力不下降,則要看內(nèi)置過(guò)濾器是否被堵塞,如果被堵塞應(yīng)沖洗或更換,若進(jìn)口端的填料發(fā)生堵塞,柱子將不可能被徹底恢復(fù),只能通過(guò)去掉進(jìn)口端的部分填料,重新填充進(jìn)行有限的柱效恢復(fù)。而且修復(fù)的厚度是2-5mm。
2.2色譜柱的保養(yǎng)。色譜柱在使用前,最好進(jìn)行柱的性能測(cè)試,并將結(jié)果保存起來(lái),作為今后評(píng)價(jià)柱性能變化的參考。我們要根據(jù)不同的情況對(duì)色譜柱進(jìn)行保養(yǎng):
①反相色譜柱每天實(shí)驗(yàn)后的保養(yǎng):使用緩沖液或含鹽的流動(dòng)相,實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)用10%的甲醇/水沖洗30分鐘,洗掉色譜柱中的鹽,再用甲醇沖洗30分鐘。注意:不能用純水沖洗柱子,應(yīng)該在水中加入10%的甲醇,防止將填料沖塌陷
②長(zhǎng)期保存色譜柱:如色譜柱要長(zhǎng)時(shí)間保存,必須存于合適的溶劑下。對(duì)于反相柱可以儲(chǔ)存于純甲醇或乙腈中,正相柱可以儲(chǔ)存于嚴(yán)格脫水后的純正己烷中,離子交換柱可以儲(chǔ)存于水(含防腐劑疊氮化鈉或柳硫汞)中,并將購(gòu)買新色譜
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