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  • 高效液相色譜儀使用中常見的問題解析

    發布于 2012/04/25閱讀(967)來源 zxj標簽 液相色譜儀

    摘要

    高效液相色譜儀使用中常見的問題解析

    內容

    高效液相色譜儀使用中常見的問題解析
     一、問:用HPLC進行分析時保留時間有時發生漂移,有時發生快速變化,原因何在?如何解決?
    答:關于漂移問題:
    溫度控制不好,解決方法是采用恒溫裝置,保持柱溫恒定
    流動相發生變化,解決辦法是防止流動相發生蒸發、反應等
    柱子未平衡好,需對柱子進行更長時間的平衡
    關于快速變化問題:
       1、流速發生變化,解決辦法是重新設定流速,使之保持穩定
       2、泵中有氣泡,可通過排氣等操作將氣泡趕出。
       3、流動相不合適,解決辦法為改換流動相或使流動相在控制室內進行適當混合
    二、問:色質聯用中毛細柱的選擇應注意什么問題?
    答:1、柱效要高
     2、熱穩定性好
     3、化學惰性強
    具體選擇應注意:
       1、柱極性。根據分析樣品選擇不同極性的柱子進行分析
       2、柱子內徑。內徑大小決定柱容量
       3、液膜厚度。分析樣品溫度一不一樣,對膜厚有不同要求,溫度高液膜要厚,溫度低液膜要薄
       4、柱長度。柱越長,柱效越高,分離效果越好,但也存在吸附問題,柱子過長,分析時間長,因此要根據樣品考慮柱子長度
       5、外涂層(柱體)的選擇
       6、另外還有儀器型號、分析對象等因素
    三、問:液相色譜中峰出現拖尾或出現雙峰的原因是什么?
    答:1、篩板堵塞或柱失效,解決辦法是反向沖洗柱子,替換篩板或更換柱子。
     2、存在干擾峰,解決辦法為使用較長的柱子,改換流動相或更換選擇性好的柱子
     
    四、問:從那些方面可以簡單判別毛細管柱子的熱穩定性好壞?
    答:1、分配容量(或容量因子)K,好的柱子在高溫運行后,分配容量K不應有明顯的下降,否則,說明柱子的熱穩定性不好。
     2、理論塔板數n,熱穩定性好的柱子經受高溫后,理論塔板數應基本保持恒定。
     3、柱子的極性。熱穩定性好的柱子,高溫前后極性變化不大,具體表現為保留指數I值沒有大的變化。
     4、噪聲。熱穩定性好的柱子在高溫下使用后,噪聲不能增加。
     5、柱子的去活層,毛細管柱子涂固定液前內部一般要用去活性試劑去活以增加惰性。質量好的毛細管柱子高溫后,去活層不應該變化,表現在對強極性樣品或酸堿性樣品的吸附性不能增加。
     
    五、問:為什么進樣器內的玻璃襯套會對色譜行為造成影響?
    答:進樣器內的玻璃襯套主要有下列作用:
       1、提供一個溫度均勻的汽化室,防止局部過熱。
       2、玻璃的惰性不如不銹鋼好,減少了在汽化期間樣品分解的可能性。
       3、易于拆換清洗 ,以保持清潔的汽化室表面,一些痕量非揮發性組分會逐漸積累殘存于汽化室,高溫下會慢慢分解,使基流增加,噪聲增大,通過清洗玻璃襯套可以消除這種影響。
       4、可根據需要選擇管壁厚度及內徑適宜的玻璃襯套,以改變汽化室的體積,而不用更換整個進樣加熱塊。從以上幾個方面可以知道玻璃襯套對色譜行為造成影響的原因。
    六、問:毛細管色譜分流進樣時,非線性分流的主要原因是什么?
    答:1、進樣器溫度太低,樣品汽化不完全,發生分級分流。
     2、進樣器溫度太高,某些組分可能發生熱分解,也有的樣品可能發生催化分解,或樣品部分地被吸附在進樣器內表面上。
     3、在分流點以前樣品沒有混合均勻或混合不充分。
     4、系統的進樣墊,柱接頭等地方漏氣。

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