摘要
蒸發(fā)光散射檢測(cè)器原理及操作
內(nèi)容
蒸發(fā)光散射檢測(cè)器
蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(ELSD)最大的優(yōu)越性在于能檢測(cè)不含發(fā)色團(tuán)的化合物,ELSD的通用檢測(cè)方法消除了常見于傳統(tǒng)HPLC檢測(cè)方法中的難點(diǎn),不同于紫外和熒光檢測(cè)器,ELSD的響應(yīng)不依賴與樣品的光學(xué)特性,任何揮發(fā)性低于流動(dòng)相的樣品均能被檢測(cè),在低溫下也能使用。目前ELSD廣泛應(yīng)用于HPLC。
蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(Evaportive light Scattering,ELSD)已經(jīng)開發(fā)生產(chǎn)15年,但是對(duì)于許多色譜工作者來說,它仍是一個(gè)新產(chǎn)品。第一臺(tái)ELSD是由澳大利亞的Union Carbide研究實(shí)驗(yàn)室的科學(xué)家研制開發(fā)的,并在八十年代初轉(zhuǎn)化為商品,八十年代以激光為光源的第二代ELSD面世。此后,通過不斷設(shè)計(jì)提高了ELSD的操作性能。現(xiàn)在ELSD越來越多的作為通用型檢測(cè)器]用于高效液相色譜,超臨界色譜(SFC)和逆流色譜中。ELSD最大的優(yōu)越性在于能檢測(cè)不含發(fā)色團(tuán)的化合物,如:碳水化合物、脂類、聚合物、未衍生脂肪酸和氨基酸、表面活性劑、藥物,并在沒有標(biāo)準(zhǔn)品和化合物結(jié)構(gòu)參數(shù)未知的情況下檢測(cè)未知化合物 。
ELSD的通用檢測(cè)方法消除了常見于傳統(tǒng)HPLC檢測(cè)方法中的難點(diǎn),不同于紫外和熒光檢測(cè)器,ELSD的響應(yīng)不依賴與樣品的光學(xué)特性,任何揮發(fā)性低于流動(dòng)相的樣品均能被檢測(cè),不受其官能團(tuán)的影響。ELSD的響應(yīng)值與樣品的質(zhì)量成正比,因而能用于測(cè)定樣品的純度或者檢測(cè)未知物。示差檢測(cè)器(RI)也可以說是一種通用型檢測(cè)器,打它靈敏度低,并與梯度脫洗不相容。質(zhì)譜是另一種通用型檢測(cè)器,但它的昂貴操作費(fèi)用和復(fù)雜性限制了它的應(yīng)用。
ELSD的獨(dú)特檢測(cè)方法,對(duì)于它的多種用途和高性能至為關(guān)鍵。ELSD檢測(cè)只要分為三個(gè)步驟:(1)用惰性氣體霧化脫洗液(2)流動(dòng)相在加熱管(漂移管)中蒸發(fā)(3)樣品顆粒散射光后得到檢測(cè)。
蒸發(fā)光散射檢測(cè)器是一種通用型的檢測(cè)器,可檢測(cè)揮發(fā)性低于流動(dòng)相的任何樣品,而不需要樣品含有發(fā)色基團(tuán)。蒸發(fā)光散射檢測(cè)器靈敏度比示差折光檢測(cè)器高,對(duì)溫度變化不敏感,基線穩(wěn)定,適合與梯度洗脫液相色譜聯(lián)用。
蒸發(fā)光散射檢測(cè)器已被廣泛應(yīng)用于碳水化合物、類脂、脂肪酸和氨基酸、藥物以及聚合物等的檢測(cè)。
主要優(yōu)勢(shì)
1) 可檢測(cè)揮發(fā)性低于流動(dòng)相的任何樣品;
2) 流動(dòng)相低溫霧化和蒸發(fā),對(duì)熱不穩(wěn)定和揮發(fā)性化合物亦有較高靈敏度;
3) 廣泛的梯度和溶劑兼容性,無溶劑峰干擾;
4) 輔助載氣提高了檢測(cè)靈敏度,保持檢測(cè)池內(nèi)的清潔,避免污染;
5) 高精度霧化和蒸發(fā)溫度控制,保證高精度檢測(cè);
6) 可與任何HPLC系統(tǒng)連接。
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