柱清洗與再生的推薦步驟
發布于 2014/11/12閱讀(3082)來源 hj1
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柱清洗與再生的推薦步驟
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柱清洗與再生的推薦步驟
壓力升高,色譜柱峰形發生變化如出現嚴重拖尾、肩峰甚至峰分岔,分離度降低,這些都強烈提示色譜柱受到污染。可采用以下步驟處理:如系統接有在線過濾器和保護柱,首先排查在線過濾器與保護柱,進行更新替換。日常操作中,當壓力升高10%或柱效降低10%時,就應考慮更換在線過濾器和/或保護柱。
使用高比例的有機溶劑進行沖洗(請注意避免鹽析出,通常可使用梯度升高法,然后維持在高比例甚至100%有機溶劑條件下)。此操作通常可洗去大部分污染物。如有機溶劑清洗不能解決問題,可采用如下方法進行色譜柱的清洗和再生。根據樣品性質以及你所了解的污染物性質選擇清洗方法,用20倍柱體積(即,對于4.6x250 mm柱,相當于80 mL)的HPLC級溶劑清洗色譜柱,將流動相溫度升至35-55?C可提高清洗效率。
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