摘要
實驗室使用不同的方法檢測眾多的醫學檢驗項目。了解檢測所使用的方法可以對檢測結果有更深刻更廣泛的認識。以下是對幾種常見的實驗室檢測方法的解釋和說明。
內容
實驗室使用不同的方法檢測眾多的醫學檢驗項目。了解檢測所使用的方法可以對檢測結果有更深刻更廣泛的認識。以下是對幾種常見的實驗室檢測方法的解釋和說明。
實驗室檢測方法的建立是涉及生物學、化學和物理學等科學的理論基礎,并涵蓋從檢測血液中膽固醇的含量、到分析DNA、再到培養可能導致感染的微生物病原體的臨床實驗室等所有方面。這些方法與烹飪方法很相似,用于確定待測生物樣品中的特定組份。實驗室工作人員遵循程序一步步操作,直到得到最終結果。
像一些食譜一樣,有些方法比其他方法更復雜,并且需要不同程度的專業知識。通常情況下,同一物質可以有一種以上的方法被用于檢測。因此,在不同的實驗室同一樣品可能使用不同的檢測方法,在比對檢測結果時,事實是至關重要的。
以下所羅列出的一些方法嘗試對一些科學的檢測原理和得出結果所必須的一些步驟進行說明。對一些方法及其之間差異的解釋說明,能更好地讓你理解以后會使用到的檢測試驗。這些項目的目的并不是要提供一個全面的可使用的方法,但是這些項目確實能夠代表這里將提及的一些方法。
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免疫學檢測
免疫球蛋白是由免疫系統產生的一種能對體內外來物質識別、結合、消除的蛋白質。免疫學檢測的基礎是在免疫球蛋白(抗體)與其特異識別的物質(外來分子,稱為抗原)之間進行特異性結合。免疫學檢測可應用于檢測血液或其他體液中是否有特異性抗體或特異性抗原的存在。
當免疫學檢測方法用于檢測血液或體液中是否存在抗體時,那么檢測試驗中需要一個特異性抗原作為檢測系統的一部分。如果被檢測樣品中存在抗體,那么它將與檢測系統中的抗原反應或結合,檢測結果也呈現陽性。如果沒有明顯的反應,測試結果為陰性。免疫學檢測抗體的應用包括類風濕因子(該試驗檢測類風濕關節炎患者中是否存在自身免疫性抗體)、西尼羅河病毒(該試驗檢測受感染的患者體內是否存在該病毒抗體)及一些預防接種后產生的抗體(如檢測乙肝表面抗體,以確保乙肝疫苗接種是成功的)。
當免疫學檢測方法檢測血液或體液中是否存在抗原時,檢測中包含與抗原相對應的抗體。患者樣品中出現的抗原與特異性抗體的反應與一些已知的反應濃度進行比較,最后得出抗原的濃度含量。免疫學檢測抗原的應用試驗包括檢測藥物濃度(如地高辛、萬古霉素)、激素(如胰島素、甲狀腺激素、雌激素)和腫瘤標志物(如PSA、CA125和AFP)。
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酶聯免疫檢測
這是免疫學檢測的方法之一。其檢測原理為抗體與特異性抗原結合形成抗原抗體復合物,再通過酶標記的抗原或抗體來檢測這些復合物。
為檢測患者血液中某一抗體,一個已知的抗原需要附著在固相載體表面,然后加入含有病人標本的溶液。如果病人的樣本中含有抗體,那么它就會與抗原結合。隨后添加酶標記的第二抗體(抗人抗體)。如果酶標記的抗體與抗人抗體結合,那么酶將會發生一些可檢測到的變化,表明病人樣本中存在相對應的抗體和該抗體的含量。
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這是一種免疫學檢測方法來檢測病人血液或組織中一些特定的蛋白質。它整合了電泳的步驟,將特定的蛋白質轉移到薄膜上。蛋白質印跡檢測方法往往作為一個確診試驗以確認抗體的存在,并作為診斷標準之一。其應用的例子包括艾滋病和萊姆病的確診試驗。
進行蛋白質印跡試驗時,沿著凝膠的一端加入含有蛋白質的樣品。多個樣品及一個質控品可并肩加入在凝膠一端不同的“泳道”中。通過電流,可以使樣品中的蛋白質在凝膠介質中移動,根據蛋白質大小和形狀的不同進行分離,最終形成類似梯子樣的條帶。這些樣品和質控品形成的梯子樣條帶隨后通過薄膜與凝膠的接觸,轉移到薄膜上。標記的抗體在隨后的一到兩個步驟中被用于檢測薄膜上是否存在結合的蛋白質。例如,在艾滋病或萊姆病確診檢測中,分離的蛋白質實質是病原體。病人的樣本加入以雜交,任何針對病原體的的抗體都會被結合,最后通過被標記的針對人免疫球蛋白抗體來檢測。某些蛋白質的出現可以通過與其他泳道質控品陽性或陰性的對比進行判斷說明。
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