摘要
食物中鈣的測定方法
內(nèi)容
食物中鈣的測定方法
一、原子吸收光譜分光光度計(jì)法
1.原理
每種元素的原子能夠吸收其特定波長的光能,而吸收的能量值與該光路中該元素的原子數(shù)目成正比。用特定波長的光照射這些原子,測量該波長的光被吸收的程度,用標(biāo)準(zhǔn)溶液制成校正曲線。根據(jù)被吸收的光量求出被測元素的含量。
2.適用范圍
依據(jù)中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn),鈣:GB12396-90。適用于所有食品及保健品中元素含量的測定,其元素含量在1mg/kg濃度以上。
3.儀器
原子吸收光譜分光光度計(jì)
4.試劑
(1) 硝酸(GB) 高氯酸(GB)
(2) 混合酸消化液:硝酸+高氯酸 按4:1混合
(3) 0.01mol/L 8-羥基喹啉溶液:
A. 配制1mol鹽酸(GB)溶液
B. 稱1克8-羥基喹啉,用1mol鹽酸定溶至10mL
C. 將上述溶液倒入容量瓶,定溶至1000mL。
(4) 1%鑭溶液:稱量11.725克La2O3(純度為99.99%),加25mL 鹽酸(GB),使之溶解,用去離子水定溶至1000mL,即成。
(5) 去離子水:(KΩ)80萬以上。
(6) 國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心提供的標(biāo)準(zhǔn)貯備液:鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液,標(biāo)準(zhǔn)液濃度均為1000μg/mL
(7) 標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)控物:國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心提供的豬肝粉,室溫干燥保存。
(8)標(biāo)準(zhǔn)儲備液配制:吸取以上鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液0.25mL,移入10 mL容量瓶中,然后用稀釋用溶液(鑭或8-羥基喹啉)定容至10mL。標(biāo)準(zhǔn)溶液須放聚乙烯瓶內(nèi),4℃冰箱保存
5.操作步驟
5.1樣品制備:每種樣品采集的總重量不得少于1.5Kg,樣品須打碎混勻后再稱重。鮮樣(如:蔬菜、水果、鮮魚等)應(yīng)先用水沖洗干凈后,再用去離子水充分洗凈,涼干后打碎稱重。所有樣品應(yīng)放在塑料瓶或玻璃瓶中4℃或室溫保存。
5.2 樣品消化:準(zhǔn)確稱取樣品干樣(0.3-0.7g左右),濕樣(1.0g左右),飲料等其他液體樣品(1.0-2.0g左右),然后將其放入50mL消化管中,加混酸15mL左右,過夜。次日,將消化管放入消化爐中,消化開始時可將溫度調(diào)低(約130℃左右),然后逐步將溫度調(diào)高(最終調(diào)至200℃左右)進(jìn)行消化,一直消化到樣品冒白煙并使之變成無色或黃綠色為止。若樣品未消化好可再加幾毫升混酸,直到消化完全。消化完后,待涼,再加5mL去離子水,繼續(xù)加熱,直到消化管中的液體約剩2mL左右,取下,放涼,然后轉(zhuǎn)移至10mL試管中,再用去離子水沖洗消化管2-3次,并最終定溶至10mL。
樣品進(jìn)行消化時,應(yīng)同時進(jìn)行空白消化。
5.3 測定:將標(biāo)準(zhǔn)儲備液配置成不同濃度系列的標(biāo)準(zhǔn)稀釋液,以備上機(jī)使用。
不同濃度系列標(biāo)準(zhǔn)稀釋液的配制 元素
儲備液濃度
μg/mL
吸取量
mL
稀釋體積
mL
標(biāo)準(zhǔn)系列濃度
μg/mL
稀釋用溶液
1%鑭溶液
或
8-羥基喹啉溶液
Ca
25
1.0
3.0
5.0
25
1.0
3.0
5.0
實(shí)驗(yàn)條件:測定鈣的波長為422.7nm儀器狹縫為0.5nm,燈位置、及電流等均按儀器使用說明調(diào)制至最佳狀態(tài),然后點(diǎn)火準(zhǔn)備測定,首先,以各標(biāo)準(zhǔn)系列繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,然后逐一測定空白及樣品,樣品及空白均應(yīng)先用8-羥基喹啉或1%鑭溶液稀釋后上機(jī)測定。
6.計(jì)算
根據(jù)儀器測定出的數(shù)據(jù),代入公式進(jìn)行計(jì)算。
(c-c0)×V×f×100
X (mg/100g)= ----------------------------
m×1000
式中:
c----測定樣品中元素的濃度 mg/L
c0---空白值
V----樣品定溶體積 mL
f-----稀釋倍數(shù)
m----取樣量 g (固體重量為g ,液體為mL)
鈣的最低檢出限為0.1μg/mL
7.注意事項(xiàng)
樣品處理要防止污染,所用器皿均應(yīng)使用塑料或玻璃制品,使用的試管器 皿均應(yīng)在使用前泡酸,并用去離子水沖洗干凈,干燥后使用。樣品消化時注意酸不要燒干,以免發(fā)生危險(xiǎn)。
二、 滴定法 (EDTA法)
1原理
鈣與氨羧絡(luò)合劑能定量地形成金屬絡(luò)合物,其穩(wěn)定性較鈣與指示劑所形成的絡(luò)合物為強(qiáng)。在適當(dāng)?shù)膒H值范圍內(nèi),以氨羧絡(luò)合劑EDTA滴定,在達(dá)到定量點(diǎn)時,EDTA就自指示劑絡(luò)合物中奪取鈣離子,使溶液呈現(xiàn)游離指示劑的顏色(終點(diǎn))。根據(jù)EDTA絡(luò)合劑用量,可計(jì)算鈣的含量。
2.儀器
(1) 微量滴定管(1-2mL)
(2) 堿式滴定管(50mL)
(3) 刻度吸管(0.5-1mL)
(4) 試管
3.試劑
(1) 硝酸(GB) 高氯酸(GB)
(2) 混合酸消化液:硝酸+高氯酸 按4:1混合
(3) 25mol/L氫氧化鉀溶液:稱取71.13克氫氧化鉀,用去離子水定容至1000mL
(4) 1%氰化鈉溶液:稱取1.0克氰化鈉,用去離子水定容至100mL
(5) 0.05 mol/L檸檬酸鈉溶液:稱取14.7克檸檬酸鈉,用去離子水定容至1000mL
(6) EDTA溶液:稱取4.50克EDTA(乙二胺四乙酸二鈉),用去離子水定容至1000mL使用時稀釋10倍即可。
(7) 鈣紅指示劑:稱取0.1克鈣紅指示劑,用去離子水使其溶解并定容至100mL,此指示劑在4℃冰箱中可保存1個月。
(8) 去離子水:(KΩ)80萬以上
以上試劑均需使用優(yōu)級純試劑,并放4℃保存
(9) 氨羧絡(luò)合劑為乙二胺四乙酸的二鈉鹽
(10) 國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心: 鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為1000μg/mL
(11) 鈣標(biāo)準(zhǔn)儲備液配制:取10mL標(biāo)準(zhǔn)溶液,移入100 mL容量瓶中,用去離子水定容至100mL
4.操作步驟
(1) 標(biāo)定EDTA濃度:取0.5mL鈣標(biāo)準(zhǔn)儲備液,用EDTA溶液滴定,標(biāo)定其EDTA的濃度,根據(jù)滴定結(jié)果計(jì)算出每毫升EDTA相當(dāng)于鈣的毫克數(shù),即滴定度T
(2)樣品及空白滴定:吸取0.1mL樣品消化液及空白液于試管中,加1滴氰化鈉溶液和0.1mL檸檬酸鈉溶液,用滴定管加1.5mL氫氧化鉀溶液,再加3滴鈣紅指示劑,立即以稀釋10倍的EDTA溶液滴定,直到指示劑由紫變藍(lán)為止。
5.計(jì)算:
T×(V-V0)×f×100
X (mg/100g)= ---------------------------
m
式中:T---EDTA滴定度 mg/mL
V----滴定樣品時所用EDTA量 mL
V0---滴定空白時所用EDTA量 mL
v----樣品定溶體積 mL
f-----稀釋倍數(shù)
m----取樣量 g (固體重量為g ,液體為mL)
本方法的檢測范圍為:5-50μg
6.注意事項(xiàng)
樣品處理要防止污染,所用器皿均應(yīng)使用塑料或玻璃制品,使用的試管器 皿均應(yīng)在使用前泡酸,并用去離子水沖洗干凈,干燥后使用。樣品消化時注意酸不要燒干,以免發(fā)生危險(xiǎn)。加指示劑后,不要等太久,最好加后立即。加氰化鈉和檸檬酸鈉目的是除去其他離子的干擾。滴定時的pH為12~24。
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