熒光檢測器在離子色譜的應(yīng)用

熒光檢測器的最大優(yōu)點(diǎn)是有極高的靈敏度和良好的選擇性，一般來說，它比紫外吸收檢測器的靈敏度要高10～1000倍，可達(dá)μg／L級，而且它所需要的試樣很少，因此在藥物和生化分析中有著廣泛的用途。
某些物質(zhì)雖然本身不能產(chǎn)生熒光，但含有適當(dāng)?shù)墓δ軋F(tuán)可與熒光試劑發(fā)生衍生反應(yīng)，生成熒光衍生物，也可用熒光檢測。衍生方法有兩種，其一為柱前衍生，此法較簡單，但定量重復(fù)性較差；其二為柱后衍生，此法重復(fù)性好，但會造成譜峰的擴(kuò)展。在離子色譜中，可以采用柱后衍生的方式對氨基酸和肽進(jìn)行分析。
早期的熒光檢測器在離子色譜分析中的應(yīng)用主要是采用離子色譜分離氨基酸，然后經(jīng)柱后衍生，用熒光檢測器檢測。隨著離子色譜技術(shù)的發(fā)展，目前離子色譜的氨基酸檢測，已經(jīng)可以采用通用的紫外檢測器，或不經(jīng)柱后衍生，直接利用脈沖安培檢測，熒光檢測器的離子色譜的應(yīng)用也趨于減少。
隨著離子色譜的廣泛應(yīng)用，特別是新的色譜柱發(fā)展，使離子色譜的應(yīng)用范圍從常規(guī)的陰離子發(fā)展到大量無機(jī)、有機(jī)可電解物質(zhì)的測定，特別對環(huán)境中痕量的有機(jī)物的分析，采用紫外檢測器往往難以達(dá)到較高靈敏度和較好檢測限。為此，我們將離子色譜與熒光檢測器聯(lián)用，用于測定痕量的有機(jī)污染物，使靈敏度大大提高，檢測限水平比紫外檢測器降低2～3個(gè)數(shù)量級。一般強(qiáng)熒光物質(zhì)往往具備如下特征：
（1）具有大的共軛π鍵結(jié)構(gòu)。
（2）具有剛性的平面結(jié)構(gòu)。
（3）具有最低的單線電子激發(fā)態(tài)。
（4）取代基團(tuán)為給電子取代基。因此，熒光檢測特別適用于含有-NH2，-NHR，-NR2，-OH，-OR，-CN基團(tuán)，又含有多環(huán)芳烴的化合物，而這類化合物只要溶于水，均可以采用離子色譜分離。
例如采用陽離子交換分離，熒光檢測器可以測定2-和4-氨基萘，采用熒光檢a析方法。
pH值對可離子化的某些熒光化合物的影響很大。例如未解離的苯酚和苯胺分子會產(chǎn)生熒光，但其離子卻不產(chǎn)生熒光。苯酚在pH=1的溶液中熒光最強(qiáng)，而pH=13的溶液中無熒光；苯胺在pH7～12的溶液中能產(chǎn)生熒光，而在pH＜2和pH＞13的溶液中都不產(chǎn)生熒光。
在紫外光照射下能產(chǎn)生熒光的化合物，絕大多數(shù)為環(huán)狀化合物，但環(huán)狀結(jié)構(gòu)并不是產(chǎn)生熒光的必要條件。某些鏈狀化合物如硬脂酸鹽、棕櫚鹽也同樣可產(chǎn)生熒光。